高效液相色譜法：以氣相色譜為基礎(chǔ)，在經(jīng)典液相色譜實(shí)驗(yàn)和技術(shù)基礎(chǔ)上建立的一種液相色譜法。

HPLC與經(jīng)典LC區(qū)別：固定相差別，輸液設(shè)備和檢測(cè)手段。1.LC：僅作為一種分離手段；①柱內(nèi)徑1~3cm，固定相粒徑>100μm且不均勻；②常壓輸送流動(dòng)相；③柱效低（H↑，n↓）；④分析周期長(zhǎng)；⑤無(wú)法在線檢測(cè)；2.HPLC：分離和分析；①柱內(nèi)徑2~6mm，固定相粒徑<10μm（球形，勻漿裝柱）；②高壓輸送流動(dòng)相；③柱效高（H↓，n↑）；④分析時(shí)間大大縮短；⑤可以在線檢測(cè)；

HPLC與GC差別：相同：兼具分離和分析功能，均可以在線檢測(cè)；主要差別：分析對(duì)象的差別和流動(dòng)相的差別；1.分析對(duì)象：GC：①能氣化、熱穩(wěn)定性好、且沸點(diǎn)較低的樣品；②高沸點(diǎn)、揮發(fā)性差、熱穩(wěn)定性差、離子型及高聚物的樣品不可檢測(cè)，占有機(jī)物的20%；HPLC：①溶解后能制成溶液的樣品；②不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制；③分子量大、難氣化、熱穩(wěn)定性差及高分子；④和離子型樣品均可檢測(cè)；⑤用途廣泛，占有機(jī)物的80%；2.流動(dòng)相差別：GC：①流動(dòng)相為惰性氣體；②組分與流動(dòng)相無(wú)親合作用力，只與固定相作用；HPLC：①流動(dòng)相為液體；②流動(dòng)相與組分間有親合作用力，為提高柱的選擇性、改善分離度增加了因素，對(duì)分離起很大作用；③流動(dòng)相種類(lèi)較多，選擇余地廣；④流動(dòng)相極性和pH值的選擇也對(duì)分離起到重要作用；⑤選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動(dòng)相；⑥可以增大分離選擇性；3.操作條件差別：GC：加溫操作；HPLC：①室溫；②高壓；（粘度大，峰展寬?。?/span>

HPLC法中分離條件的選擇：1.固定相與裝柱方法的選擇：選粒徑小的、分布均勻的球形固定相（dp≤10μm）；首選化學(xué)鍵合相，勻漿法裝柱；2.流動(dòng)相及其流速的選擇：選粘度小、低流速的流動(dòng)相—甲醇，1mL/min；3.柱溫的選擇：選室溫25℃左右；

---本文摘自《實(shí)驗(yàn)與分析》